Коллагеназа

Нет в наличии

Коллагеназа (EC 3.4.24.3) — металлопротеаза микробного происхождения, расщепляющая нативный коллаген в области тройной спирали. Получают из клостридии гистолитики и родственных штаммов; активность выражают в условных единицах на миллиграмм (U/mg) по высвобождению продуктов из субстрата. В лабораторной практике применяют для выделения клеток из тканей, в косметологии — в ферментных пилингах, в медицине — в мазях для энзиматической некрэктомии (например, 250 U/g в вазелиновой основе).

Основные применения

  • Диссоциация тканей в клеточных культурах
  • Ферментные пилинги и маски в косметологии

Стандарты и документы

Активность по субстрату коллагена; CAS 9001-12-1

Характеристики

CAS
9001-12-1
Молярная масса
68–125 кДа (формы α–ζ)
Класс вещества
Металлоэндопептидаза EC 3.4.24.3
Внешний вид
Белый или светло-бежевый лиофилизат
Растворимость
Растворим в буферных растворах pH 6–8
Температура хранения
−20 °C (лиофилизат)

Применение по отраслям

Выделение клеток из тканей

Коллагеназу используют вместе с гиалуронидазой для диссоциации печени, поджелудочной железы и опухолевых трансплантатов. Рабочий раствор готовят в буфере pH 7,0–7,4 при 37 °C. Активность подбирают по типу ткани: мягкие ткани требуют меньшей концентрации, фиброзные — большей.

Ферментные пилинги

В профессиональных пилингах коллагеназу включают в маски с контролируемым временем экспозиции 5–15 минут. Фермент размягчает роговой слой и коллагеновые мостики. Концентрация в готовой маске обычно 0,1–1% по активности.

Практические нюансы

Совместимость с антисептиками

Физраствор — совместим. Повидон-йод — полная инактивация. Серебряные повязки — частичное подавление активности. Дакин раствор — совместим после промывки.

Медицинская мазь 250 U/g

Стандартная зарегистрированная мазь с коллагеназой: 250 единиц фермента на 1 г белого вазелина. Наносят 1 раз в сутки на некротические язвы и ожоги после промывки физраствором.

Механизм расщепления

Фермент гидролизует пептидные связи в тройной спирали коллагена, преимущественно у глицина, высвобождая некротическую ткань для грануляции.

Хранение и безопасность

Условия хранения
−20 °C для сухого порошка; раствор — 2–8 °C не более 24 ч.
Меры безопасности
Перчатки и очки; избегать ингаляции пыли и контакта с кожей в концентрированном виде.
Перевозка
Сухой лёд или термоконтейнер при необходимости.
Вентиляция
Вытяжной шкаф при взвешивании.
Температурный режим
−20 °C (хранение)
Тара
Герметичные флаконы с осушителем.

Частые вопросы

Как измеряют активность коллагеназы?
Активность выражают в условных единицах на мг (U/mg) по количеству высвобождённого аминокислотного эквивалента из коллагенового субстрата при 37 °C и pH 7,5 за заданное время. Сверяйте методику в паспорте поставщика.
Почему фермент не для приёма внутрь?
Коллагеназа — протеолитический фермент, разрушающий белки. В желудочно-кишечном тракте она инактивируется, но не является пищевой добавкой; применяется только внешне и в лабораторных протоколах.
Какой pH оптимален?
Оптимальный диапазон 6,0–8,0. При pH ниже 5 активность необратимо снижается; при pH выше 8,5 — обратимо до возврата к 7,4.
Что инактивирует коллагеназу?
Тяжёлые металлы (ртуть, серебро), некоторые ПАВ, йодсодержащие антисептики. Перед нанесением ферментной мази рану промывают физраствором без этих компонентов.
Чем отличаются классы I и II?
У клостридии гистолитики выделяют шесть форм (α–ζ) двух классов с разной специфичностью; их действие на коллаген комплементарно. Коммерческие препараты часто содержат смесь форм.
Как готовить раствор для культур?
Лиофилизат растворяют в стерильном буфере (например, PBS с Ca²⁺/Mg²⁺) на льду, фильтруют через 0,22 мкм мембрану. Типичная концентрация 0,5–2,5 mg/mL в зависимости от ткани.