Лизоцим

Нет в наличии

Лизоцим HB — яичный мурамидазный фермент (КФ 3.2.1.17, CAS 12650-88-3) с молекулярной массой около 14,3 кДа и активностью не ниже 20 000 ед/мг. Белый или кремовый порошок гидролизует β-1,4-связи пептидогликана грамположительных бактерий; активность калибруют по просветлению суспензии микрококка лизодейктикуса. В лаборатории фермент лизирует клетки перед выделением ДНК; в сыроделии добавка E1105 подавляет клостридиум тиробутирикум и снижает риск позднего вспучивания твёрдых сыров. Оптимум действия близок к нейтральной зоне; белок яичный — требуется аллергенная маркировка. Хранят сухо и прохладно в закрытой таре.

Основные применения

  • Лизис бактериальных клеток и получение сферопластов в молекулярной биологии
  • Пищевой консервант E1105 в сыроделии и виноделии
  • Компонент антимикробных фармацевтических и косметических формул

Стандарты и документы

Активность по CoA; пищевое применение как E1105; лабораторные марки для молекулярной биологии.

Характеристики

CAS
12650-88-3
Формула
белок ~14,3 кДа (129 аминокислот)
Молярная масса
~14 300
Класс вещества
Гидролаза, мурамидаза (КФ 3.2.1.17)
Внешний вид
Белый или кремово-белый порошок
Растворимость
Растворим в воде (типично около 10 мг/мл и выше)
Температура хранения
Предпочтительно −20 °C для длительного хранения; краткосрочно +2…+8 °C
Класс опасности
Может вызывать сенсибилизацию дыхательных путей (категория 1 по SDS)
ГОСТ / ТУ
E1105 (пищевое применение)

Применение по отраслям

Лизис клеток и выделение нуклеиновых кислот

Лизоцим добавляют в лизирующие буферы для разрушения клеточных стенок грамположительных бактерий и подготовки сферопластов. Для грамотрицательных клеток часто комбинируют с ЭДТА, ослабляющим наружную мембрану. Фермент используют при выделении плазмидной и хромосомной ДНК, а также как модельный белок в кристаллографии и спектроскопии.

Консервант E1105 в сырах и вине

Как пищевая добавка E1105 лизоцим подавляет грамположительные бактерии, включая клостридии, вызывающие позднее вспучивание твёрдых сыров. В виноделии фермент контролирует яблочно-молочное брожение, действуя на молочнокислые бактерии и не затрагивая дрожжи алкогольного брожения.

Местные антисептические и уходовые формулы

Лизоцим входит в составы леденцов, спреев для горла и отдельных косметических средств как белковый антимикробный компонент. В фармацевтике учитывают аллергенный потенциал яичного белка (компонент Галле d 4).

Практические нюансы

Рабочие концентрации для лизиса

Для бактерий часто готовят 5–10 мг/мл в буфере без детергентов; для эукариотических клеток — 1–2 мг/мл. Раствор при pH 4–5 хранят в холодильнике несколько дней; замораживать аликвоты предпочтительно однократно.

Сыры и позднее вспучивание

В твёрдых сырах лизоцим подавляет клостридии тиробутирикум, снижая риск позднего вспучивания. Типовые дозы в молоке порядка десятков мг/л; точную норму задаёт технологическая инструкция предприятия.

Температура и инактивация

Лиофилизат стабилен годами на холоде; в растворе нагрев выше 60 °C быстро снижает активность. При пастеризации пищевых матриц учитывают термолабильность фермента.

Хранение и безопасность

Условия хранения
Сухая герметичная тара, предпочтительно −20 °C; защита от влаги и света.
Меры безопасности
Избегать вдыхания пыли: ряд SDS классифицирует лизоцим как респираторный сенсибилизатор. Работать в перчатках и очках; при аллергии на яйцо — усиленные меры контроля. Не допускать попадания порошка на слизистые.
Перевозка
В оригинальной упаковке с температурным режимом по SDS/CoA партии.
Вентиляция
Местная вытяжка при навешивании порошка; не создавать аэрозоль.
Температурный режим
Долгосрочно −20 °C; краткосрочно +2…+8 °C; рабочие растворы не нагревать выше оптимума реакции без необходимости.
Тара
Плотно закрываемые банки/флаконы; после вскрытия минимизировать контакт с влажным воздухом.

Частые вопросы

Как измеряют активность лизоцима?
Классический метод — турбидиметрия по микрококку лизодейктикусу: одна единица Шугара снижает оптическую плотность на 0,001 в минуту при заданных pH и температуре. Сверяйте определение единицы в CoA конкретной партии.
Почему для грамотрицательных бактерий нужен ЭДТА?
У грамотрицательных клеток пептидогликан защищён наружной мембраной. Хелатирование ионов металлов ЭДТА повышает её проницаемость, после чего лизоцим эффективнее гидролизует стенку.
Является ли лизоцим аллергеном?
Да, яичный лизоцим — известный аллерген (Галле d 4). В пищевых продуктах его происхождение должно быть указано на этикетке; сотрудникам с аллергией на яйцо нужна защита при работе с пылью.
Можно ли хранить порошок при комнатной температуре?
Краткосрочно допустимо в сухом месте, но для сохранения активности производители рекомендуют −20 °C. При комнатной температуре срок годности обычно короче, чем при заморозке.
Чем пищевой E1105 отличается от лабораторного порошка?
Пищевой грейд нормируется по микробиологии, тяжёлым металлам и допускам Codex/регламентов. Лабораторный акцент — на активности, отсутствии нуклеаз и пригодности для молекулярной биологии. Не подменяйте грейды без сверки спецификации.
При каком pH фермент наиболее активен?
Рабочий диапазон обычно 6–9; максимум часто отмечают около pH 6,2 при умеренной ионной силе. В кислой среде (pH 3–4) лиофилизат и растворы стабильнее при хранении, но активность ниже оптимума.