ХЕППС, CAS 16052-06-5

Реальная тара может отличаться от изображённой на фотографии

Хеппс

Нет в наличии

ХЕППС (синонимы EPPS, HEPPS; химическое название — 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинпропансульфоновая кислота, CAS 16052-06-5, формула C₉H₂₀N₂O₄S) — звиттерионный буфер Гуда квалификации LS производства Панреак для биохимических и аналитических работ. Он удерживает pH в диапазоне 7,3–8,7 при pKa 8,0 (25 °C), то есть работает в слабощелочной области, где фосфатные и карбонатные системы менее удобны. Белый или слегка кремовый кристаллический порошок плавится при 237–239 °C, молярная масса составляет 252,33 г/моль, чистота по титрованию не менее 99 %. Его применяют в электрофорезе белков, ферментативных тестах, буферах для клеточных культур вне CO₂-инкубатора и в калибровочных растворах для спектрофотометрии: поглощение при 260 и 280 нм у него очень низкое. Вещество может раздражать кожу, глаза и дыхательные пути при вдыхании пыли, поэтому порошок взвешивают в перчатках и избегают распыления.

Категории: ,

Основные применения

  • Буферирование pH 7,3–8,7 в биохимии
  • Электрофорез, перенос белков и пробоподготовка
  • Культура клеток и ферментативные тесты
  • Калибровочные растворы и спектрофотометрия

Стандарты и документы

Квалификация LS Панреак; чистота не менее 99 % по титрованию.

Характеристики

CAS
16052-06-5
Формула
C₉H₂₀N₂O₄S (EPPS / HEPPS)
Молярная масса
252,33 г/моль
Класс вещества
Буфер Гуда, звиттерион
Внешний вид
Белый или слегка кремовый кристаллический порошок
Растворимость
25,2 г/л в воде при 20 °C по справочным данным; растворы 0,1 M прозрачны, более концентрированные требуют проверки
Температура хранения
Комнатная температура (+15…+25 °C), сухое место
Класс опасности
Раздражитель

Применение по отраслям

Буфер электрофореза и пробоподготовки

ХЕППС используют в буферах для SDS-PAGE, переноса белков и ферментативных тестов при pH 7,3–8,7. Звиттерионная структура слабо связывает белки и ионы металлов, поэтому буфер мало мешает ферментам по сравнению с фосфатными системами. Типичная рабочая концентрация составляет 10–25 mM. Низкое УФ-поглощение (для 1 M раствора оптическая плотность при 260 нм не более 0,055, при 280 нм не более 0,045) даёт чистый фон при детекции белков. Также буфер встречается в фиксирующих растворах для световой микроскопии и в модельных опытах по гликированию белков, где важно держать слабощелочной pH.

Стабилизация pH вне CO₂-инкубатора

Буфер добавляют в изотонические растворы и среды, где карбонатная система не удерживает pH из-за отсутствия CO₂. Для клеточных протоколов типична концентрация 10–25 mM. Условия подбирают для каждой линии клеток отдельно.

Калибровочные растворы и спектрофотометрия

ХЕППС LS применяют для приготовления калибровочных растворов, изотонических сред для пробоподготовки и фаз для спектрофотометрии при pH 7,5–8,5, когда карбонатный буфер нестабилен в открытых кюветах. Низкий фон в области 260–280 нм позволяет работать с белками без лишних поправок на буфер.

Практические нюансы

Буферные характеристики ХЕППС

pKa 8,0 (25 °C); диапазон pH 7,3–8,7; молярная масса 252,33; tпл 237–239 °C; растворимость 25,2 г/л (20 °C); pH 0,1 M раствора 5,0–6,5 до установки NaOH; чистота не менее 99 %; потеря при высушивании не более 1,0 %.

ХЕППС, HEPES и Трис

ХЕППС — рабочая область pH 7,3–8,7 (pKa 8,0); HEPES — 6,8–8,2 (pKa 7,5); Трис — 7,0–9,0 (pKa 8,06). Выбор зависит от нужного pH, температуры опыта и чувствительности фермента к ионной силе.

Где справочные данные расходятся

Температура плавления в паспорте поставщика 237–239 °C, а в одном из листов безопасности указано 231 °C; для заказа ориентируются на паспорт партии. Растворимость 25,2 г/л согласуется не со всеми описаниями: у производителей встречаются и прозрачные 1 M растворы, и значения порядка 24 г на 100 мл, поэтому концентрированные растворы проверяют пробой. Диапазон хранения +15…+25 °C задан спецификацией, а +10…+30 °C — допустимые рабочие границы склада.

Приготовление буфера для электрофореза и калибровки

Для 25 mM буфера с pH 8,0 навеску 6,31 г на литр растворяют в деионизованной воде и доводят pH раствором NaOH; для 10 mM калибровочного раствора берут 2,52 г на литр. Перед спектрофотометрией проверяют оптическую плотность при 260 нм. Раствор хранят в тёмной таре при +4 °C не более двух недель.

Хранение и безопасность

Условия хранения
Сухое место +15…+25 °C, плотно закрытая тара, вдали от сильных окислителей.
Меры безопасности
Вещество может раздражать кожу, глаза и дыхательные пути. Работают в перчатках и очках, порошок взвешивают под вытяжкой или при местном отсосе, пыль не вдыхают. При попадании в глаза промывают водой несколько минут.
Перевозка
Без ограничений, как обычный лабораторный реактив.
Вентиляция
Вытяжка при работе с порошком.
Температурный режим
+10…+30 °C
Тара
Плотно закрытая заводская тара.

Частые вопросы

Чем ХЕППС отличается от HEPES?
У ХЕППС боковая цепь пропансульфоновая, а у HEPES этансульфоновая. Из-за этого pKa смещён с 7,5 до 8,0, и рабочая область уходит в слабощелочную сторону (7,3–8,7 вместо 6,8–8,2).
Как приготовить 0,1 M раствор?
Навеску 25,23 г растворяют примерно в 800 мл воды, доводят pH до 8,0 раствором NaOH и добавляют воды до 1 л. Раствор прозрачен при 20 °C; готовый раствор хранят в холодильнике и используют в течение двух недель.
Какова растворимость в воде?
Справочная величина — 25,2 г/л при 20 °C, но производители приводят и существенно более высокие значения, вплоть до прозрачного 1 M раствора при подходящем pH и лёгком нагреве. Для конкретной методики растворимость проверяют пробным растворением.
Подходит ли для УФ-спектрофотометрии?
Да. Для 1 M раствора оптическая плотность не превышает 0,055 при 260 нм и 0,045 при 280 нм, то есть фон в белковом диапазоне низкий.
Что означает квалификация LS?
Это квалификация Панреак для биохимических и аналитических задач: чистота не менее 99 % по титрованию и контроль следов металлов по внутренней спецификации производителя.
Какой CAS и какие синонимы у вещества?
CAS 16052-06-5. Встречаются названия EPPS, HEPPS и 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинпропансульфоновая кислота.
Какая концентрация буфера обычно нужна для SDS-PAGE?
Для типичного протокола готовят 25 mM раствор с pH 8,0: 6,31 г на литр деионизованной воды, pH доводят NaOH. Перед электрофорезом полезно проверить оптическую плотность буфера при 260 нм.
Есть ли у вещества опасные свойства?
Это раздражитель: порошок может раздражать кожу, глаза и дыхательные пути. Требуются перчатки, очки и аккуратное взвешивание; с сильными окислителями вещество не хранят.

Связанные материалы

  • HEPES — Близкий буфер Гуда с pKa 7,5
  • Трис — Буфер с pKa около 8,06 и иной температурной зависимостью

Аналоги

  • EPPS повышенной чистоты (≥99,5 %) для чувствительных методик

Используют вместе с

  • Натрия гидроксид
  • NaCl
  • EDTA

Источники

Смотрите также в: Лабораторные реактивы и аналитика Фармацевтическое и биохимическое сырьё

Похожие