Реальная тара может отличаться от изображённой на фотографии

Циклогексимид

Нет в наличии

Циклогексимид (C15H23NO4, CAS 66-81-9, M 281,35 г/моль) — природный антигрибковый антибиотик из стрептомицес гризеус, известный как актидион. Белые или стекловидные гранулы марки AR ~98% Паллаб Chemicals блокируют транслокацию в 80S рибосомах эукариот, не затрагивая прокариотический синтез белка. Растворим в этаноле, метаноле и DMSO; применяют в экспериментах отслеживания полужизни белков, отбора дрожжевых штаммов и рибосомном профилировании. Эффект обратим после удаления реагента. Токсичен при проглатывании — работа в вытяжном шкафу с СИЗ.

Категории: Лабораторные реактивы и аналитика, Фармацевтическое и биохимическое сырьё

Основные применения

Ингибитор эукариотического синтеза белка в клеточных культурах
Определение периода полужизни белков методом остановки трансляции
Селективная среда для дрожжей и рибосомное профилирование

Стандарты и документы

AR ≥98%; контроль по CoA Паллаб с указанием чистоты и внешнего вида.

Характеристики

CAS: 66-81-9
Формула: C15H23NO4
Молярная масса: 281,35 г/моль
Класс вещества: антибиотик, ингибитор трансляции
Внешний вид: Белые или стекловидные гранулы
Температура хранения: +2…+8 °C, защита от света
Класс опасности: токсичное вещество (T)

Применение по отраслям

Подавление синтеза белка в пробирке

Циклогексимид добавляют в культуральную среду дрожжей и клеток эукариот на концентрации 10–100 µg/ml для блокирования элонгации. Связывание с E-сайтом 60S рибосомы останавливает транслокацию тРНК. Паллаб AR 98% подходит для исследовательских лабораторий; эффект снимается промывкой клеток или заменой среды. Для протоколов оценки полужизни белка фиксируют время добавления и концентрацию в СОП.

Селективные среды и контроль дрожжей

В средах для пивоварения и микробиологии циклогексимид подавляет рост дрожжей и плесени, позволяя выделять бактерии. В дерматологических культурах используют для дерматофитов с контролем концентрации. Растворы хранят в морозильной камере; рабочие концентрации готовят из этанолового стока.

Практические нюансы

Эксперимент оценки полужизни белка

Добавить CHX на заданной концентрации → выдержка → сбор клеток на разных временных точках → лизат и иммуноблоттинг. Сравнение с контролем без CHX показывает период полужизни белка. Фиксируйте время и температуру в СОП.

Механизм на рибосоме

CHX и лактимидомицин связываются с E-сайтом 60S и блокируют eEF2-транслокацию. Отличие: CHX может сочетаться с деацилированной тРНК в E-сайте; более крупные молекулы блокируют уже первый цикл элонгации.

Токсикология и утилизация

Крайне токсичен; классифицируется как опасное вещество в США при больших объёмах. Утилизация через оператор химических отходов; рабочие поверхности обрабатывают мыльным раствором или NaHCO3 по SDS.

Хранение и безопасность

Условия хранения: +2…+8 °C, защита от света, герметичная тара.
Меры безопасности: Вытяжной шкаф; перчатки; не глотать. При попадании на кожу — промыть водой.
Перевозка: По правилам токсичных веществ; UN не для всех фасовок — сверять SDS.
Вентиляция: Постоянная вытяжка при работе с порошком и растворами.
Температурный режим: Склад +2…+8 °C для долгого хранения.
Тара: Стеклянные банки с плотной крышкой.

Частые вопросы

Как циклогексимид блокирует синтез белка?

Реагент связывается с E-сайтом 60S рибосомы и блокирует транслокацию тРНК, останавливая элонгацию в эукариотах. Прокариотические 70S рибосомы не затрагиваются — это основа селективности в смешанных культурах.

Какая рабочая концентрация для клеток?

Типично 10–100 µg/ml в среде; для сахаромицес церевизиэ часто 0,05–1,6 µg/ml в зависимости от штамма. Концентрацию валидируют на конкретной линии; токсичность и скорость действия зависят от типа клеток.

Обратим ли эффект циклогексимида?

Да, после удаления реагента из среды или промывки клеток синтез белка восстанавливается. Это используют при оценке деградации белков: добавление CHX останавливает трансляцию, снятие позволяет отследить распад уже синтезированных молекул.

Как приготовить сток циклогексимида?

Растворите в этаноле или DMSO до 10–50 mg/ml, храните при −20 °C. Перед использованием разводите в среду до рабочей концентрации. Этаноловый сток не превышает 0,1% этанола в финальной среде без проверки токсичности для клеток.

Почему актидион опасен?

Высокая острая токсичность (LD50 крыс перорально ~2 mg/kg), репротоксичность и повреждение ДНК по литературным данным. Используется только в исследованиях в пробирке, не в медицине. Работа с СИЗ и учёт в журнале токсичных реагентов.

Как хранить гранулы Паллаб AR?

При +2…+8 °C в сухом тёмном месте в оригинальной банке. Растворы — при −20 °C не дольше срока указанного в протоколе. Не оставлять при комнатной температуре длительно.