Нингидрин, CAS 485-47-2

Реальная тара может отличаться от изображённой на фотографии

Нингидрин

Нет в наличии

Нингидрин (2,2-дигидроксииндан-1,3-дион, C₉H₆O₄, CAS 485-47-2, молярная масса 178,14 г/моль) — светло-жёлтый кристаллический реагент аналитической чистоты AR производства Паллав Chemicals. При нагревании с первичными аминогруппами аминокислот и пептидов образуется сине-фиолетовый пурпур Руэмана; вторичные амины иминокислот (пролин, оксипролин) дают жёлтый продукт. Вещество растворяется в воде, этаноле и ацетоне; температура плавления около 250 °C с разложением. Применяют как проявитель в тонкослойной хроматографии (обычно 0,2% раствор), в аминокислотных анализаторах, тесте Кайзера для твердофазного пептидного синтеза и для выявления потожировых следов на бумаге и картоне. Перед работой сверяют паспорт партии; пыль раздражает дыхательные пути — нужны СИЗ.

Категории: ,

Основные применения

  • Визуализация аминокислот и аминов в ТСХ и колориметрии
  • Контроль свободных аминогрупп в пептидном синтезе
  • Проявление папиллярных следов на пористых поверхностях

Стандарты и документы

Квалификация AR для анализа; чувствительность к аминокислотам подтверждают по паспорту партии.

Характеристики

CAS
485-47-2
Формула
C₉H₆O₄
Молярная масса
178,14 г/моль
Класс вещества
гидратированный трикетон индана, аналитический реагент
Внешний вид
светло-жёлтые или белые кристаллы
Растворимость
хорошо растворим в воде и щелочах; растворим в этаноле и ацетоне
Плотность
около 0,86 г/см³ (справочно)
Температура хранения
прохладное сухое место, защита от света

Применение по отраслям

Нингидриновая реакция и аминокислотный анализ

Нингидрин применяют для качественного и количественного определения свободных α-аминогрупп после гидролиза белков и пептидов. Интенсивность сине-фиолетовой окраски пропорциональна концентрации аминогрупп; измерение ведут около 570 нм. В ТСХ используют 0,2%-ные растворы в ацетоне или этаноле с нагревом пластины. Пролин и оксипролин дают жёлтый продукт — это учитывают при интерпретации.

Тест Кайзера в твердофазном синтезе

В твердофазном пептидном синтезе нингидрин служит индикатором свободных N-концевых аминогрупп после снятия защиты. Синее окрашивание указывает на незакрытый амин; бледно-жёлтый или бесцветный результат после успешного сочетания подтверждает прохождение реакции.

Проявление следов на пористых поверхностях

Растворы нингидрина в ацетоне или этаноле (часто 0,2–5 %) используют для выявления потожировых следов на бумаге, картоне и необработанной древесине. Аминокислоты пота дают пурпурное окрашивание гребней. Агрессивные растворители могут размывать чернила — для документов выбирают менее полярные системы или специальные составы.

Практические нюансы

Как читать нингидриновую реакцию

Первичные аминокислоты дают сине-фиолетовый пурпур Руэмана с максимумом около 570 нм. Пролин — жёлтый. Аммиак также даёт окрашивание. Интенсивность растёт с нагревом, но перегрев ТСХ-пластин создаёт фон и маскирует слабые пятна.

Ограничения в криминалистике

Лучшие результаты — на пористых носителях. На термобумаге ацетон и этанол часто уничтожают изображение. Для рукописных документов оценивают риск размытия чернил до обработки.

Нингидрин и флуорогенные аналоги

Классический нингидрин даёт видимый пурпурный продукт и прост в полевых условиях. Флуорогенные аналоги и 1,2-индандион повышают чувствительность на слабых следах, но требуют иного освещения и валидации методики.

Хранение и безопасность

Условия хранения
Плотно закрытая тара, сухость, защита от прямого света, комнатная или слегка пониженная температура.
Меры безопасности
Перчатки и очки обязательны: вещество раздражает кожу и глаза, вредно при проглатывании, может раздражать дыхательные пути. Известны случаи профессиональной сенсибилизации дыхательных путей у сотрудников криминалистических лабораторий.
Перевозка
Обычная перевозка лабораторных реактивов при целостности упаковки.
Вентиляция
Вытяжной шкаф при приготовлении аэрозольных и ацетоновых растворов.
Температурный режим
Хранение при комнатной температуре; рабочие растворы предпочтительно охлаждать.
Тара
Плотно закрываемые банки из стекла или инертного пластика.

Частые вопросы

Почему пролин окрашивается иначе?
Пролин и оксипролин — иминокислоты со вторичным азотом. С нингидрином они образуют жёлтый продукт, а не сине-фиолетовый пурпур Руэмана, характерный для большинства α-аминокислот.
Какую концентрацию брать для ТСХ?
Часто используют около 0,2 % нингидрина в ацетоне или этаноле. После опрыскивания пластину нагревают при 60–105 °C под контролем, избегая перегрева и тёмного фона.
Что такое тест Кайзера?
Это быстрая проверка свободных аминогрупп на смоле твердофазного пептидного синтеза: синий цвет означает незакрытый N-конец, отсутствие синего — успешное сочетание.
Можно ли проявлять следы на документах ацетоном?
Ацетоновые растворы эффективны, но могут размывать чернила и портить термобумагу. Для ценных документов выбирают менее агрессивные растворители или специальные составы.
Чем опасен нингидрин при постоянной работе?
Помимо раздражения кожи и глаз, описаны случаи аллергического ринита и астмы у сотрудников, длительно работающих с реагентом. Нужны перчатки, очки и вытяжка.
Как хранить готовый раствор?
Рабочие растворы держат в холоде, в плотно закрытой тёмной таре и используют в разумные сроки: при комнатной температуре они быстрее теряют активность.
Подходит ли AR Паллав для аминокислотного анализатора?
Квалификация AR рассчитана на аналитические задачи. Для валидированных методик сверяют чувствительность к аминокислотам и чистоту по паспорту конкретной партии.

Связанные материалы

  • Индан-1,2,3-трион — безводная трикетонная форма в равновесии с гидратом
  • 1,2-Индандион — родственный реагент для проявления следов
  • Флуорескамин — альтернативный флуорогенный реагент на амины

Аналоги

  • раствор нингидрина с ацетатом кадмия
  • о-фталевый альдегид для аминов

Используют вместе с

  • ацетон
  • этанол
  • коллидин или уксусная кислота в составах для ТСХ

Источники

Смотрите также в: Лабораторные реактивы и аналитика Фармацевтическое и биохимическое сырьё

Похожие